Изотопы, используемые в радиоавтографии.
В настоящее время чаще всего используются изотопы, излучающие бета-частицы. Как правило для метки в гистологических исследованиях используется тритий. Первые автографы с использование трития были изготовлены еще в 50-е годы (Fitzgerald et al. 1951), однако широкое его применение началось после того, как в Брукхэвенской лаборатории был получен меченый тритием тимидин. Поскольку водород входит в состав всех органических веществ, то, используя тритий, можно получать самые разные соединения, несущие радиоактивную метку. Чем меньше энергия испускаемой частицы, тем короче трек, оставляемый ей при движении в фотоэмульсии и тем точнее можно локализовать расположение меченого атома. Длина пробега бета-частиц трития около 1-2 мкм, наиболее вероятная энергия 0,005 МэВ, а трек состоит в большинстве случаев из одного зерна серебра, что позволяет локализовать источник излучения не только в относительно крупных клеточных структурах, таких как ядро, но и в отдельных хромосомах.
Введение "меченых" метаболитов в организм позволяет проследить включение изотопа в клетки тканей животного, что дает возможность исследовать самые разные биохимические процессы в живом организме.
Получение абсолютных данных – концентрации меченого вещества в изучаемом объекте редко бывает целью радиоавтографического исследования, для этого необходимо знание ряда условий, определение которых затруднено. Поэтому количественные радиоавтографические исследования обычно проводят путем сравнения концентрации зерен серебра над исследуемым объектом и контролем, при этом контрольные данные удобно принимать за единицу, или 100%.
Характеристики некоторых изотопов, используемых
в радиоавтографии биологических объектов
Изтоп |
Период полураспада |
Частица |
Максимальная энергия излучения |
3H |
12.35 лет |
b- |
0.019 МэВ |
14C |
5730 лет |
b- |
0.155 МэВ |
35S |
87.4 дня |
b- |
0.176 МэВ |
32P |
14.3 дня |
b- |
1.709 МэВ |
45Ca |
164 дня |
b- |
0.250 МэВ |
Бета-частицы радиоактивного фосфора способны пролетать в ядерной эмульсии расстояния до нескольких миллиметров, трек состоит из десятков редко расположенных частиц серебра – так, радиоактивный фосфор может быть использовани только для изучения распределения изотопа в тканях, локализацию в отдельных клеточных структурах установить невозможно.
Радиоактивные сера и углерод могут быть использованы для локализации изотопа в отдельных клетках, при условии того, что они крупные или расположены на достаточном расстоянии друг от друга, что может быть достигнуто в мазках крови или клеточных суспензиях.
1 2