Рост можно измерять различными методами.
Реже для определения биомассы используют нефелометрию
измерение светорассеяния под углом 90 ° к падающему пучку света. Обратите внимание, однако, что большая часть света рассеивается лишь на небольшой угол, 2-12 °. Это высокочувствительный метод, но он может давать ошибочные результаты при наличии в среде примесей в виде частиц. Для точности измерений нефелометр необходимо часто калибровать.
Определение биомассы.
Турбидиметрия как способ определения биомассы в ряде случаев
неприменима (для культур с мицелиальным или поверхностным ростом, для бактерий, образующих длинные нити, агрегаты и скопления клеток, а также для смешанных культур, в которых варьирует количественное соотношение видов); измерение количества сырой биомассы дает обычно весьма неточные результаты. В связи с этим для измерения биомассы определяют массу высушенных клеток. Отцентрифугированную (или отфильтрованную) и промытую водой биомассу высушивают до постоянного веса в сушильном шкафу при 105 °С. Другим способом сушки служит лиофилизация. Сухое вещество клеток составляет обычно 10-20% их сырой массы. Количество биомассы можно также оценить косвенно по содержанию белка в культуре. Для этого клетки осаждают кислотой, после чего определяют белок с помощью колориметрического метода. Соотношение биомассы клеток и количества в ней белка постоянно только при, сбалансированном росте, т. е. когда состав клеток по мере роста культуры не претерпевает изменений. Однако в большинстве случаев это соотношение изменяется в конце экспоненциальной фазы роста, а также при образовании бактериями большого количества запасных веществ. Способом измерения роста может также служить определение содержания С или N в биомассе.
Метаболические параметры, пропорциональные росту.
Если рост культуры относительно сбалансированный и метаболизм не разобщен с биосинтезом, увеличение биомассы удобно контролировать по поглощению субстратов (например, О2 или источника углерода) либо по образованию продуктов обмена (например, СО2). Концентрацию газов наиболее просто определить на входе и выходе культиватора с помощью масс-спектрометра, инфракрасного абсорбционного спектроскопа или другого прибора. Зная экономический коэффициент (отношение массы клеток к количеству потребленного субстрата) и метаболические параметры роста, можно оценить увеличение биомассы.
1 2